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荧光分光光度计的用途

作者:admin    来源:未知    发布时间:2020-12-13 18:37    浏览量:

荧光分光光度计是用于扫描液相荧光标记物所发出的荧光光谱的一种仪器。

其能提供包括激发光谱、发射光谱以及荧光强度、量子产率、荧光寿命、荧光偏振等许多物理参数,从各个角度反映了分子的成键和结构情况。通过对这些参数的测定,不但可以做一般的定量分析,而且还可以推断分子在各种环境下的构象变化,从而阐明分子结构与功能之间的关系。

荧光分光光度计的激发波长扫描范围一般是~,发射波长扫描范围~。可用于液体、固体样品(如凝胶条)的光谱扫描。

荧光分光光度计

它的来光路有两套分光系统自,分别的激发和发射光分光系统,光传播方向是互垂直的.绘制谱图方法:1.激发波长不变,以发射波长进行扫描;2.发射波长不变,以激发波长进行扫描.要到最佳激发波长和发射波长,都要做这两种扫描。

荧光分光光度计有什么优缺点

优点:灵敏度高,可以用于扫描液相荧光标记物所发出的荧光光谱,不但可以做一般的定量分析,

而且还可以推断分子在各种环境下的构象变化,

从而阐明分子结构与功能之间的关系。1、荧光的光强并不高,所以呈线性情况有时不很理想;

2、某些反应荧光持续的时间较短;

3、荧光的发散方向不集中,不像透射光那样集中,强度高;

4、受某些离子的干扰影响,荧光会湮灭,试验速度必须要快。

荧光分光光度计与荧光光度计有什么样的区别

荧光测定需要单色性较高的激发光,通常会在光束进入样品之前经单色器分光内,保留所感兴趣容的激发波长或波段。

较常见的单色器为棱镜或是光栅,在一些简易的荧光系统中也可使用滤波片。在该系统中,由激发光源发出的光经激发单色器分光获得特定波长的激发光,然后射入样品池,激发荧光物质的荧光发射。

荧光分光光度计与荧光光度计的区别在于两者之间的分光系统,前者可以采用色散型单色器,可对入射和发射光波长进行选择,可进行入射/发射波长扫描,多见于大型通用仪器;后者采用滤光片,具有固定的光谱通带,一般用于专用仪器中。

荧光分光光度计常用的光源是什么

看你分光光度计的波长范围。以上的用高级白炽灯,有短波的加氘灯。

荧光分光光度计原理及结构?

基本原理

由高压汞灯或氙灯发出的紫外光和蓝紫光经滤光片照射到样品池中,激发样品中的荧光物质发出荧光,荧光经过滤过和反射后,被光电倍增管所接受,然后以图或数字的形式显示出来。物质荧光的产生是由在通常状况下处于基态的物质分子吸收激发光后变为激发态,这些处于激发态的分子是不稳定的,在返回基态的过程中将一部分的能量又以光的形式放出,从而产生荧光.

不同物质由于分子结构的不同,其激发态能级的分布具有各自不同的特征,这种特征反映在荧光上表现为各种物质都有其特征荧光激发和发射光谱;,因此可以用荧光激发和发射光谱的不同来定性地进行物质的鉴定。

在溶液中,当荧光物质的浓度较低时,其荧光强度与该物质的浓度通常有良好的正比关系,即IF=KC,利用这种关系可以进行荧光物质的定量分析,与紫外-可见分光光度法类似,荧光分析通常也采用标准曲线法进行。

基本结构

1.光源:

为高压汞蒸气灯或氙弧灯,后者能发射出强度较大的连续光谱,且在~范围内强度几乎相等,故较常用。

2.激发单色器:

置于光源和样品室之间的为激发单色器或第一单色器,筛选出特定的激发光谱。

3.发射单色器:

置于样品室和检测器之间的为发射单色器或第二单色器,常采用光栅为单色器。筛选出特定的发射光谱。

4.样品室:

通常由石英池(液体样品用)或固体样品架(粉末或片状样品)组成。测量液体时,光源与检测器成直角安排;测量固体时,光源与检测器成锐角安排。

5.检测器:

一般用光电管或光电倍增管作检测器。可将光信号放大并转为电信号。

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